ABSTRACT. The widespread use of artificial insemination has allowed the expansion of genetic progress. However, it also brought consequences such as the expansion of lethal hereditary diseases and the increase in inbreeding. The object of this study was to establish a fast and sensitive molecular assay to detect bovine leukocyte adhesion deficiency (BLAD) and deficiency of uridine monophosphate synthase (DUMPS) carriers in Uruguayan Holstein cattle by means of high resolution melting (HRM) curve analysis. By testing previously confirmed carrier and non-carrier animals, we set up a rapid, simple, and inexpensive diagnostic test using PCR followed by HRM curve analysis. The PCR-HRM genotyping method was effective for the discrimination of BLAD and DUMPS homozygous genotypes, and the BLAD heterozygous genotype. We conclude that the PCR-HRM assay is a robust, reliable, and economical tool for the detection of these mutations in the Holstein breed, which may be implemented in genetic selection programs. © 2018, Universidade Federal do Parana. RESUMO. O uso generalizado de inseminação artificial, permitiu expandir o progresso genético, no entanto, também trouxe consequências na expansão de doenças hereditárias letais e aumento da endogamia. O objetivo deste estudo foi estabelecer um ensaio molecular rápido e sensível para detectar animais portadores da deficiência de adesão leucocitária bovina (BLAD) e da deficiência da uridina monofosfato sintetase (DUMPS) usando a análise de curva de alta resolução (HRM) em bovinos da raça Holandesa Uruguaia. Através do uso de animais portadores e não portadores previamente confirmados, montamos um teste de diagnóstico rápido, simples e de baixo custo usando PCR seguido de análise de curva HRM. O método de genotipagem da PCR-HRM foi efetivo para a discriminação dos genótipos homozigotos BLAD e DUMPS e do genótipo heterozigoto BLAD. Concluímos que o ensaio PCR-HRM é uma ferramenta poderosa, confiável e econômica para a detecção destas mutações na raça Holandesa, o que poderia ser implementado em programas de seleção genética. © 2018, Universidade Federal do Parana.