ABSTRACT.- Sex determination through genotyping is an efficient tool for verifying recorded sex in sheep. Since males possess only one X chromosome, heterozygous genotypes should not be present in the non-pseudoautosomal region (nPAR) of the X chromosome. There fore, determining the boundaries of the pseudoautosomal region (PAB) is necessary for a reliable sex prediction. Although it is recommended to use SNPs from both the X and Y chromosomes, the SNP chip we used did not contain Y chromosome markers. This study aimed to determine the pseudoautosomal region (PAR) on the X chromosome in sheep using the ARS-UI_Ramb_v2.0 genome assembly and test a method for sex pre diction based solely on X chromosome SNPs. The training dataset was composed of 210 sheep from various breeds and crossbreeds, genotyped with the Ovine Infinium® HD SNP BeadChip to determine the PAR region. A validation dataset of 229 sheep was used to assess the accuracy of sex determination using the OvineSNP50 BeadChip. After quality control, the PAR region was found to span from 0 to 7.24 Mb and was iden tified by SNPs that exhibited high heterozygosity rates in males. The proposed ap proach, that uses only X chromosome SNPs, achieved a sex prediction accuracy of 94% with precision rates of 99% for males and 89% for females. This study showed that it is possible to predict sex in sheep using only X chromosome nPAR SNPs. This is the first study that has used this approach specifically using the ARS-UI_Ramb_v2.0 genome assembly. ------------------- RESUMEN.- La determinación de sexo mediante genotipado es eficaz para verificar el sexo declarado en el pedigrí. Como los machos poseen un solo cromosoma X, no se deberían observar genotipos heterocigotos en la región no pseudoautosómica (nPAR). Por lo tanto, es fundamental establecer claramente los límites de la región pseudoautosómica (PAB) para una correcta identificación del sexo. Aunque se recomienda utilizar SNP de los cromosomas X e Y, el chip de genotipado utilizado en este estudio no contenía marcadores del cromosoma Y. El objetivo de este trabajo fue identificar la región pseudoautosómica (PAR) en el cromosoma X en ovinos utilizando el ensamblado ARS-UI_Ramb_v2.0 y evaluar un método para la predicción de sexo basado únicamente en los SNP del cromosoma X. Para definir la región PAR, se utilizó una población de 210 ovinos, genotipados con el Ovine Infinium® HD SNP BeadChip, y para la validación, 229 ovinos, genotipados con el OvineSNP50 BeadChip. Después del control de calidad, se observó que la región PAR se extendía desde 0 a 7,24 Mb, identificada mediante SNP que exhibieron altas tasas de heterocigosidad en machos. El enfoque propuesto, que utiliza únicamente los SNP del cromosoma X, alcanzó una exactitud de 94% en la predicción de sexo, con una precisión de 99% en machos y de 89% en hembras. Este estudio demostró que es posible predecir el sexo en ovinos utilizando únicamente los SNP de la región nPAR del cromosoma X. Este es el primer trabajo en aplicar este método utilizando el ensamblado ARS-UI_Ramb_v2.0. ----------------------- RESUMO.- A determinação do sexo por genotipagem é uma ferramenta eficiente para verificar o sexo registrado. Como os machos possuem apenas um cromossomo X, os genótipos heterozigotos não devem estar presentes na região não pseudo-autossômica (nPAR) do cromossomo X. Portanto, determinar os limites da região pseudoautossômica (PAB) é necessário para uma predição confiável do sexo. Embora seja recomendado usar SNP dos cromossomos X e Y, o chip SNP que usamos não continha marcadores do cromossomo Y. Este estudo teve como objetivo determinar a região pseudoautos-sômica (PAR) no cromossomo X em ovinos usando o genoma ARS-UI_Ramb_v2.0 e testar um método para predição de sexo baseado apenas em SNP do cromossomo X. Para definição da região PAR foi utilizada uma população de treinamento de 210 ovinos genotipados com o Ovine Infinium® HD SNP BeadChip e para validação, 229 ovinos genoti-pados com o OvineSNP50 BeadChip. Após controle de qualidade, observou-se que a região PAR se estendia de 0 a 7,24 Mb, identificada por SNP que exibiam altas taxas de heterozigosidade em machos. A abordagem proposta, que usa apenas SNPs do cromossomo X, atingiu uma exatidão de predição de sexo de 94%, com taxas de precisão de 99% para machos e 89% para fêmeas. Este estudo mostrou que a predição de sexo em ovinos pode ser feita usando ape-nas SNP da região nPAR do cromossomo X. Este é o primeiro estudo que usou esta abordagem especificamente usan-do o genoma ARS-UI_Ramb_v2.0. © 2025, Author. All rights reserved.